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与超薄切片机相关的文献报道

归档日期:07-23       文本归类:虎杖      文章编辑:爱尚语录

  摘要:超薄切片机指制作供透射型电子显微镜用的超薄切片的切片机。它可将各种包埋剂包埋的样品用玻璃刀或钻石刀切成50纳米以下的超薄切片。超薄切片机有机械推进式和金属热膨胀式两种类型。......

  液循环对抗缺血/再灌注损伤,以保护肾脏形态和功能。我们将中药丹参与异搏定对比,首次探讨丹参注射液对高能冲击波致肾脏损伤的保护作用及可能机制。1材料和方法1.1材料普通光学显微镜;LKB-2088超薄切片机(瑞典);日立H-600透射式电镜(日本);丹参注射液(上海第一生化制药厂);异搏定注射液(上海禾丰制药有限公司);健康家兔45只(西安交通大学实验动物中心提供),体质量2500~3000g,雄

  实验时用注射用水配制成所需浓度。1.2试剂碘化丙啶(PI),Sigma公司;RNAseA,QIAGEM公司;TritoX-100,CK公司;其余试剂均为市售分析纯。1.3仪器LKBⅢ型超薄切片机(瑞典);日立H-600型透射电镜(日本);COULTERESP型流式细胞仪(美国)。1.4动物SD大鼠,体重250~280g,由西安医科大学实验动物中心提供(医动字第8-005号)。2方法

  染色、成像,通过数字技术构建出史上第一个超高精度的三维脑图。研究人员说,这一成果有助了解人脑感知、思考和语言等过程的秘密。来自德国和加拿大的研究人员20日在《科学》杂志上报告说,他们利用一种称为超薄切片机的特殊工具,将由石蜡包裹的脑组织小心翼翼地切成7400多片,每片的厚度只有20微米,然后将切片染色,用于发现细胞体,接着对它们进行数字化处理。经过总共1000个小时的艰辛工作,终于创建出一幅三维

  05)购自Dakocytomation公司,封闭血清、DAB显色试剂盒等购自北京中杉公司,其余试剂均为市售分析纯。1.3仪器设备TECNAI-10型透射电子显微镜(PHILIPS公司),超薄切片机(LKB公司)。1.4免疫组织化学染色1.4.1动物固定、取材动物用5%水合氯醛麻醉,开胸,经左心室插管到主动脉,剪开右心耳,先后灌注生理盐水200mL和4%多聚甲醛溶液300mL。灌注

  cnai20200KV到现在的Tecnai20200KV,TecnaiG20Spirit以及TitanKrios300KV,同时配备了齐全的样品制备设施,包括电镜快速冷冻制样设备,高压冷冻装置,超薄切片机,冷冻蚀刻仪以及用于碳膜制备的真空镀膜仪,另外还配备了图像收集与处理的计算机集群,安装了数据自动收集软件Leginon等。会议特邀报告为徐伟研究员的TheDrawbacksofamorphous

  nylacetate);③上海易微信息科技有限公司提供emicron生产的Epon812包埋剂组件。1.2.2设备:①日本产日立H-700H透射电子显微镜;②瑞典产LKB-UltrotomeⅤ型超薄切片机;③博进:手提式X射线X型;④手术器械一套。1.3观察指标及方法1.3.1取材:将目标兔耳缘静脉注射20ml空气栓塞处死,用骨刀快速切取完整L6、7椎间盘,取横截面为1mm&ti

  程研究所提供。心肌组织线粒体超微结构观察:取缺血心肌组织5mm×3mm×2mm大小,2.5%戊二醛固定24h以上,OSO4后固定,丙酮梯度脱水,环氧树脂浸泡、包埋,修块后用瑞典产LKB-Ⅲ型超薄切片机切片,厚约500~700A°,铅铀双重染色,H-600透射电镜观察、拍片。1.5统计学方法各组数据均以均数±标准差(x±s)表示,单因素方差分析进行组间比较。2结果2.1心肌组织

  。电子显微镜(图2-12)与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作光源,用电磁场作透镜。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。这种切片需要用超薄切片机(ultramicrotome)制作。电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍、由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。表2-2不同光源的波长名称可见

  小鼠额叶、海马组织形态变化进行检测,为进一步研究脑缺血再灌流损伤提供依据和手段。1材料与方法1.1材料实验动物全部采用由白求恩医科大学实验动物中心提供的雄性昆明小鼠6~7周龄,体重25~28g。超薄切片机(LKB-Ⅱ),OLYMPUS显微镜(日本)。1.2方法1.2.1动物分组假手术组5只作为对照组,缺血再灌流组,根据再灌不同时间提取标本并分7组,即:术后1h、1、3、7天、2、4、6周、每小组

  化试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物技术有限公司。二甲苯、酒精、苏木精、伊红、PBS缓冲液,中性树脂,染色缸,载玻片,盖玻片,载玻片支架。1.2.2方法于超薄切片机做4m连续组织切片,贴片于经过APES预处理的载玻片上,56℃烘箱过夜使其粘附紧密。切片脱蜡至水,组织切片于二甲苯中常规脱蜡30min,梯度酒精水合每浓度5min。照试剂盒说明书操作,进

  甲醛混合固定液2mL,于4℃下固定2h,再用磷酸缓冲液冲洗后,用1%锇酸固定1.5h,逐级脱水,再用70%酒精饱和醋酸铀块染8-10h,用环氧树脂618包埋,于60℃下聚合48h,用瑞典LKB型超薄切片机制成厚约50nm的切片,置于铜制切片载网上干燥保存。1.3线粒体结构观察和灰度测定应用JEM100CX型透射电子显微镜,放大15×103倍观察线粒体。每只实验鼠选取逼尿肌为纵行走向、靠

  0张切片,与对照组切片同时放在同一张载玻片上染色,减免误差。采用酸性复红甲基绿色法[5]可显示不同程度的早期坏死心肌,坏死心肌呈红色,正常心肌呈绿色。电镜采用常规epon812包埋法。Lkbv型超薄切片机切片,醋酸铀-枸橼酸铅双重电子染色,在jem100cxⅡ型电子显微镜下观察。2结果2.1心肌损伤程度在10倍光镜下观察,根据坏死的心肌细胞的多少分为5级。Ⅰ级:整个切片上只有少量散在红色坏死斑点

  胞(视为平滑肌细胞)数。其值在两组间亦应有显著的差异。此外,尚可在实验组见到内膜缺损或裂隙。(3)电镜观察动脉处死后迅速取材(部位同光镜),2.5g戊二醛及1%锇酸双重固定,常规制备样品,以超薄切片机切片,乙酸钠,柠檬酸铝染色,透射电镜观察。扫描电镜样品经逐级酒精脱水,临界点干燥,镀膜后观察。在动物模型组应见到内皮细胞变性坏死脱落,见到髓磷脂小体,细胞间连接变直变宽,内皮下间隙扩大,有较多的

  )灌注(先快后慢)。迅速断头取脑,任取一侧含MCA始段的脑组织块在3%的戊二醛中沿MCA纵轴修剪为1.0mm×1.0mm×2.0mm大小,继续用3%戊二醛做前固定,锇酸后固定,环氧树脂包埋,AO超薄切片机切片,片厚50~80nm,载膜铜网捞片,铅铀双染,在JEM-200EX透射电镜下观察摄片。2结果在光镜下,可见弹性纤维形成一完整的内弹性膜(IEL),染色深、颜色均匀,呈波浪状折叠,折叠

  0张切片,与对照组切片同时放在同一张载玻片上染色,减免误差。采用酸性复红甲基绿色法[5]可显示不同程度的早期坏死心肌,坏死心肌呈红色,正常心肌呈绿色。电镜采用常规epon812包埋法。Lkbv型超薄切片机切片,醋酸铀-枸橼酸铅双重电子染色,在jem100cxⅡ型电子显微镜下观察。2结果2.1心肌损伤程度在10倍光镜下观察,根据坏死的心肌细胞的多少分为5级。Ⅰ级:整个切片上只有少量散在红色坏死斑点

  E染色,光学显微镜下观察。以0.1MPBS替代吲哚青绿作为正常对照。1.3ICG处理后尸体眼透射电镜标本的制备同前处理的视网膜(7眼)置于电镜固定液中,经系列乙醇脱水,包埋,固化,LKB-型超薄切片机切片50~60nm,3%醋酸铀-枸橼酸铅双重染色,JEM-1200EX(JAPAN)透射电镜下观察,照相。2结果2.1ICG处理后尸体眼光学显微镜下的观察0.05mg/mlICG作用尸体

  90%丙酮15min,100%丙酮15min3次。③浸透:100%丙酮+包埋液(1∶1)4h,包埋液2h。④环氧树脂618包埋。⑤固化:37℃12h、45℃12h、60℃24h。⑥超薄切片:修理细胞块后在LKB超薄切片机上用玻璃刀切片,厚度为5~10nm。⑦染色:醋酸铀30min,枸杞酸铅10min。⑧电镜下观察细胞形态。1.2.3MTT比色法检测细胞活力:选取实验组对照组各6孔,实验组缺糖时

  ,连服3天,第3天下午行水囊引产术,对照组只行水囊引产术。标本均于胎儿娩出后立即取材。取材于肾皮质,经2.5%戊二醛前固定,1%锇酸后固定,乙醇系列脱水,Epon812环氧树脂包埋,LKB-Ⅲ型超薄切片机(瑞典)半薄切片定位后做超薄切片,醋酸双氧铀及柠檬酸双重染色,JEM-1200EX型透射电子显微镜(日本JEOL公司)观察并摄片。2结果肾细胞的超微结构有以下变化。2.1对照组肾细胞

  2.3.2电镜检查透射电镜样品制备:取培养组织1mm×1mm×1mm大小,经2.5%戊二醛前固定,1%锇酸后固定,丙酮系列脱水,环氧树脂Epon812包埋,Leiac超薄切片机半薄切片定位后,再行超薄切片,醋酸铀及柠檬酸铅双重染色,JEM-1010型透射电镜观察,摄片。图1、2第1代细胞呈集落形成纺缍形或长梭形,类似成纤维细胞;2代后细胞体积有所增大,有角状突起,

  锋利的双面刀片冠状面将软骨切成1mm3小块,立即投入4℃5%戊二醛溶液中固定24h后,0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液(pH7.35)漂洗24h。1%锇酸后固定2h,乙醇逐级脱水后环氧树脂包埋,超薄切片机70nm超薄切片,经醋酸双氧铀及柠檬酸铅双重染色,HITACHI600透射电镜观察,拍片。1.4图像分析每1张TUNEL标记切片显微摄像镜下(放大10×40),随机选取4处

  鼓膜穿孔通常由外伤或中耳炎所致,临床上有多种多样的方法可以修补。我院于2003~2006年对72例鼓膜穿孔病采用取乳突区超薄皮片,在耳内镜下行鼓膜修补术,术前术后经耳内镜观察,效果满意,现报告如下。1资料与方法1.1病例选择标准(1)经临床及耳内镜检查确认为干性中央性鼓膜穿孔,穿孔占鼓膜的1/3以内面积;(2)外伤性鼓膜穿孔;(3)咽鼓管功能良好;(4)听阈45dB为传导性耳聋。1.2一般资料本组

  鼓膜穿孔通常由外伤或中耳炎所致,临床上有多种多样的方法可以修补。我院于2003~2006年对72例鼓膜穿孔病采用取乳突区超薄皮片,在耳内镜下行鼓膜修补术,术前术后经耳内镜观察,效果满意,现报告如下。1资料与方法1.1病例选择标准(1)经临床及耳内镜检查确认为干性中央性鼓膜穿孔,穿孔占鼓膜的1/3以内面积;(2)外伤性鼓膜穿孔;(3)咽鼓管功能良好;(4)听阈45dB为传导性耳聋。1.2一般资料本组

  《自然—材料学》报道了一种超薄装置可吸附在人体皮肤上并监测导热性和温度。通过志愿者的使用,科学家发现该装置原型具有非常高的灵敏度,可以搜集相关临床信息,比如血液流动和皮肤吸水性。JohnRogers等人在一块弹性类似人体皮肤的微穿孔可弯曲材料放置多阵列微型传感器和加热器。因此,病人在传感器测量时,不会感到不适。而且皮肤组织的出汗也不会受到这些装置的影响。研究人员将该装置原型与医院标测皮肤温度时

  丝绸以柔软轻薄着称,科学家利用丝绸的这一特性设计出一种以丝绸为载体的超薄电极阵列,植入大脑,粘附于脑组织表面,丝绸自然分解后,电极阵列就与脑组织紧密契合,忠实记录脑神经活动。这种可延展、超薄的设计可以用于制造更好的脑机接口,脑机接口可用于记录瘫痪病人的脑神经活动,并将其转换为控制命令,用以控制假肢、计算机鼠标键盘、机械手臂等,从而帮助那些肢体残疾、脊髓损伤、中风、肌萎缩侧索硬化,以及其他神经肌肉退

  经、血管等组织外露,临床常用任意皮瓣或带蒂皮瓣修复创面,但此种皮瓣切取面积受限、术后外观臃肿、断蒂时间较长,常需二期手术去脂。1999年6月~2004年6月,我科采用腹壁浅血管及旋髂浅血管为蒂的腹部超薄皮瓣修复手部严重电击伤导致手部软组织缺损伴肌腱、神经、血管外露8例,手术效果满意。1临床资料1.1一般资料本组8例,男7例,女1例,年龄5~52岁,平均31岁。受伤电压1万伏,电流入口3例,出口5例

  华东理工大学材料科学研究所日前宣布,该所采用独特的专利技术,实现了玉米塑料(聚乳酸)薄膜的稳定生产,得到了厚度小于等于4um的可完全降解超薄塑料薄膜。该薄膜为目前世界最薄的完全降解薄膜,且单位面积价格接近目前PE地膜价格。专家表示.这种农民用得起的叮完全降解材料,将使中国抗“白色污染”能力得到极大提升,并开创农业及包装材料发展的新纪元。目前,利用聚乳酸强度高的特性,开拓农用薄膜、包装领域可完全降解

  妇科超薄细胞检测的研究探讨(pdf)【摘要】目的通过对液基超薄细胞系统(TCT)的16826例标本结果总结、分析、研究,探讨宫颈癌的发病情况。方法利用妇科液基超薄细胞检测系统(TCT),对妇科子宫颈管刷取的细胞标本进行制片、固定、染色、显微镜检查;根据《子宫颈细胞学Bethesda报告系统》(TBS)判断标准,做出诊断。结果16826例标本中,发现1例鳞状细胞癌;2例CIN-3;12例CIN-

  当前超薄切片染色普遍采用的方法是蜡盘滴染法,即将染液滴在蜡染色盘上,载有切片的铜(镍)网面朝染液覆盖在染滴上。这种方法因蜡盘要反复使用,所以每染1次就要进行彻底清洗,且载网密切接触空气,操作费时窝工、污染概率高、工作效率低。在实际工作中,笔者试用封口膜制成一次性染色“舟”,染色在“舟”上进行。通过多年上千例电镜样品观察,其结果表明,此法简单易行、省时节水、污染概率低、工作效率高,现总结报告如下。

  【摘要】目的探讨液基超薄细胞技术(thinprepcytologictest,TCT)和Bethesda系统(TBS)在早期宫颈病变诊断中的临床价值。方法对2007年10月至2009年6月在桐乡市第二人民医院就诊的2900例患者进行TCT和TBS细胞学分类诊断,对TCT阳性者进行阴道镜下活检病理对照。结果2900例TCT检测患者中,涂片异常305例(10.51%),其中不典型鳞状细胞(ASC)15

  据英国广播公司(BBC)28日报道,最近美国科学家研发出一种可应用于超薄照相机上的人造昆虫眼。这种微凹状人造昆虫眼含有密集安装于一个针头大小面积上的8,500个六角形透镜。据《科学》杂志的描述,这种圆屋顶形状的结构与蜜蜂的眼睛相似。加州大学柏克莱分校的研究人员称,这项工作还有助于阐明昆虫是如何发育成这样的复杂视觉系统。该研究论文的共同撰写人鲁克·李教授说:“虽然昆虫仅仅是由单个细胞发育而来,但

  影响视力。这样必须在病变的黄斑区移植正常的视网膜色素上皮才能达到手术的预期效果。因异体移植有排斥反应,于是,将黄斑区以外自体正常的视网膜色素上皮移植到病变的黄斑区自然就成为人们的研究方向。微米级超薄植片的精细手术这是一个极为精细的显微手术,所有的操作都要在眼内进行。目前,国外的医生仅能做到将成片的视网膜色素上皮连同其外面的脉络膜一起切下然后移植到病变的黄斑区,但由于植片较厚,术后的远期效果不理

  液基超薄细胞制片在非妇科细胞检查方面的应用研究(pdf)【摘要】目的通过对两种制片方法所做各种标本的分析研究,探索能够提高细胞学检查阳性率的方法。方法用传统方法和液基细胞两种方法制片,研究两种制片的诊断结果。结果传统涂片细胞学诊断结合了细胞形态、排列方式、背景等,比较容易诊断,但细胞厚薄不一,单个细胞易漏诊;液基制片所取标本量大,偶然性小,细胞平铺,单个细胞容易识别,但大多数失去了细胞排列方式和背

  0ml。取2支管内再生神经的中段用4%戊二醛及1%四氧化锇(磷酸盐配制)作预固定和后固定(pH7.2~7.4)各2h,酒精及丙酮逐级脱水,采用环氧树脂618定向包埋,用ReichertJung超薄切片机作0.5m厚半薄切片,经1%甲苯胺蓝-天青Ⅱ染色后在光镜下定位,制备超薄切片,用醋酸双氧铀及枸橼酸铅染色,在Hitachi-600透射电镜下观察再生神经轴突形态及血管密度与分布。2结

  生物制剂有限公司;2.5%锇酸固定液。1.4主要仪器设备手术显微镜:Moller-WEDEL,光学显微镜(型号:Olympuscx40,日本制造)、H-600透射镜(日本制造);LKB-V型超薄切片机(日本制造)。1.5方法1.5.1光学片制备实验组与对照组均为15例,取自白内障超声乳化人工晶体植入术中环形撕取的6mm大小的前囊膜组织,用30℃平衡盐冲洗后放入75%酒精中固定,送至病

  生物制剂有限公司;2.5%锇酸固定液。1.4主要仪器设备手术显微镜:Moller-WEDEL,光学显微镜(型号:Olympuscx40,日本制造)、H-600透射镜(日本制造);LKB-V型超薄切片机(日本制造)。1.5方法1.5.1光学片制备实验组与对照组均为15例,取自白内障超声乳化人工晶体植入术中环形撕取的6mm大小的前囊膜组织,用30℃平衡盐冲洗后放入75%酒精中固定,送至病

  水,-20℃下聚甲基丙烯酸甲酯包埋。等聚甲基丙烯酸甲酯凝固后在低温下切片,切片厚200~300μm,用胶水将切片粘在一个塑料支架上,手工将它磨至(50±51)μm,直接在荧光显微镜下观察。然后用超薄切片机把剩余的标本切片,切片厚15μm,直接在光学显微镜下观察。128统计学分析所有数据均采用平均值±标准差表示,采用单因素方差分析。P<005代表差异有显著性。SAS612统计软件进行统计学

  选取2例取材,切取1mm3全层心肌组织块,缓冲液冲洗后置于25g/L的戊二醛固定液中固定,继之用10g/L锇酸固定液作后固定2h,PBS冲洗,常规乙醇丙酮系列脱水,Epon812环氧树脂包埋,超薄切片机切片,醋酸铀和柠檬酸铅染色,最后置透射电镜下观察并拍照。1.4统计学方法数据以s表示,使用SPSS13.0统计软件进行t检验。2结果2.1两组心肌HSP70的含量实验组HSP70

  戊二醛磷酸缓冲液(pH7.2)固定48h。1%的四氧化锇后固定1h,丙酮逐级脱水,包埋(包埋剂的配制:环氧树脂812∶815∶DDSA∶DMP-30=2.5∶2.5∶8∶0.175)。LKB-5超薄切片机切片,厚度为50nm。醋酸铀染色,日立H-600型电子显微镜照相。1.5突触摄片计数免疫组织化学方法每只动物每个指标随机取脊髓片3张,高倍镜下以OlympusDP11数码相机在背角截取一屏计数。

  ,迅速置于预冷的2.5%戊二醛溶液中前固定,4℃保存,备透射电镜观察。切取组织时,应避免挤压。将标本以0.1mol/L磷酸缓冲液(PBS)冲洗3次,乙醇梯度脱水,环氧树脂(Epon)812包埋。超薄切片机(ReichertJung)切片,切片厚60nm,醋酸双氧铀柠檬酸铅双重染色,透射电镜(日本电子,JEOL,JEM1200EX)观察,每个标本观察2个切片。透射电镜下观察肝细胞膜、线粒体、

  高分辨率的脑模型也是将分子数据(诸如细胞递质受体表达的数据)整合到基准脑空间内的一个前提。为了创建这样的一个图谱,KatrinAmunts及其同事利用了计算能力及成像分析上的进展。他们用一种叫做超薄切片机的特殊工具小心地将一名65岁女性的石蜡包裹的脑切成7400多片组织切片,每片的厚度为20微米。每一高度折叠的切片被染色以发现细胞体,并接着进行数字化处理。这些数字化的脑切片接着被刻意地进行排列和

  ,用0.1MPBS(pH7.2)洗2遍,加入6%戊二醛固定2h(4℃),0.1MPBS(pH7.2)洗2遍,1%锇酸固定2h,丙酮梯度脱水,环氧丙烷过渡、环氧树脂Epon812包埋,60℃聚合,超薄切片机切片,枸橼酸铅、醛酸铀双染色,日立H-600电镜观察。2结果2.1诱导的成骨细胞超微结构诱导的成骨细胞大体与正常组织的成骨细胞的超微结构一致;细胞外间质成分有钙盐沉积于胶原纤维中。胞浆中有一定量

  悬液,分别置于离心管中,以1500r/min离心5min,弃上清液,用PBS液漂洗2次,以去除培养液,所收集的各组心肌细胞经2.5%戊二醛和锇酸双重固定,丙酮逐级脱水,混合树脂包埋,LKB-V型超薄切片机切片。醋酸铀-柠檬酸铅双重染色,透射电子显微镜观察。1.2.5统计学方法实验数据处理用均数±标准差(ˉx±s)来表示,统计推断:用统计软件SPSS10.0进行多组间方差分析。2结果2.1虎杖水煎

  用丙酮逐级脱水,国产环氧树脂618包埋。所有操作按贵州师范大学实验中心电镜室“动物组织标本固定包埋操作规程”进行标本包埋块的制作。1.5指标检测包埋块制作完成后,按贵阳医学院电镜室超薄切片操作规程在LKB-V型超薄切片机上行超薄切片,经醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色后,在日立H-600型透射电镜上进行观察、摄片。实验所用锇酸、戊二醛、环氧树脂等试剂均由贵州师范大学电镜室提供。2结果2.1对放

  光吸收值。1.5DNA断裂分析酚氯仿法抽提各组胃癌细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形条带。1.6透射电镜观察收集细胞,经戊二醛和四氯化锇固定,梯度酒精脱水,Epon-812包埋,在超薄切片机上切成薄片,醋酸钠和柠檬酸铅染色,JEM-1200EX型透射电镜观察。1.7涂片细胞检测1.7.1制作细胞涂片在无菌条件下制备细胞悬液,细胞浓度为2×105个/ml,按上述分组给药并培养

  黄素治疗组。1.2药品与试剂姜黄素(上海试剂三厂出口),以6%乙醇+6%聚乙二醇400+88%水助溶后配制成水溶液(浓度为1mg/ml)。主要仪器有:德国Medim全自动石蜡切片机,Leica光学显微镜,Leica超薄切片机,荷兰FEITecnaiG212型透射电子显微镜。1.3模型建立给药方法实验周期为7天。(1)正常对照组:皮下注射生理盐水。(2)模型组:大鼠第一天上午单纯皮下注射CCl4(

  。现普遍采用的是在进行免疫染色前,以H2O2液蚀刻数分钟,以去锇和增强树脂的穿透性。3.超薄冰冻切片按照Tokuyasu建立的方法,将组织置于2.3mol/L蔗糖液中,以液氮速冻,在冰冻超薄切片机上切片,切片厚度可略厚于常规树脂切片。冰冻超薄切片由于不需经固定、脱水、包埋等步骤,直接进行免疫染色,所以抗原性保存较好,兼有包埋前和包埋后染色的优点。三、包埋(一)树脂包埋国内现普

  。包埋前染色的标本,切片薄切片后不需染色,直接在相差显微镜下观察免疫反应部位呈黑点状,定位后进一步作超薄切片,这样,可以明显提高免疫电镜阳性检出率。5.超薄切片电镜标本制作见第七章,应用超薄切片机(Ultrotome)进行切片。6.碳蜡切片碳蜡(Carbowax),学名聚乙烯二醇(Polyethleneglycol,PEG)为水溶性蜡。根据其分子量不同,碳蜡有多种,如400、800

  90%丙酮15min,100%丙酮15min3次。③浸透:100%丙酮+包埋液(1∶1)4h,包埋液2h。④环氧树脂618包埋。⑤固化:37℃12h、45℃12h、60℃24h。⑥超薄切片:修理细胞块后在LKB超薄切片机上用玻璃刀切片,厚度为5~10nm。⑦染色:醋酸铀30min,枸杞酸铅10min。⑧电镜下观察细胞形态。1.2.3MTT比色法检测细胞活力:选取实验组对照组各6孔,实验组缺糖时

  心机(上海安亭科学仪器厂),JelsonP1000可调式微量移液器(法国Jelson公司),6孔培养板(丹麦Nunclon公司),日本电子JEM-1230型透射电镜(日本),LKB公司NOVA型超薄切片机(瑞典)。1.3试剂台酚兰(美国Sigma公司),胶原酶Ⅳ型(美国Sigma公司),RPMI-1640培养基(美国Life公司),其余化学试剂均为AR级。1.4肝组织悬液的制备留取的肝细

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